Tecnica di vitrificazione di ovuli

Da (embriologa), (ginecologo), (embrióloga), (embriologa) e (invitra staff).
Aggiornato il 28/09/2020

La vitrificazione o congelamento degli ovociti è una tecnica di riproduzione assistita che consiste nell'ottenere gli ovuli della donna per mantenerli a temperature molto basse per un periodo di tempo indefinito.

Questo metodo viene utilizzato sia per preservare la fertilità nelle donne che vogliono ritardare il momento della maternità, sia per trattamenti di fecondazione in vitro (FIVET) che richiedono la crioconservazione degli ovociti.

Il vantaggio principale della vetrificazione degli ovuli è che la qualità degli ovuli viene mantenuta per tutto il periodo di congelamento, cioè gli ovuli saranno della stessa qualità di quando sono stati vetrificati una volta che la donna decide di utilizzarli.

Cos'è il congelamento degli ovuli?

Il congelamento degli ovuli è un metodo che consiste nell'utilizzare l'azoto liquido per congelare gli ovuli precedentemente estratti dalle ovaie della donna al fine di conservarli a una temperatura molto bassa, in particolare a -196°C.

La tecnica utilizzata oggi per congelare gli ovuli è la vitrificazione. Per questo motivo i termini congelamento e vetrificazione sono attualmente utilizzati come sinonimi.

La vitrificazione degli ovuli ha due indicazioni principali:

Ritardare la maternità fino a tarda età porta ad una perdita del numero e della qualità degli ovuli nella riserva ovarica, per cui una donna può avere difficoltà ad ottenere una gravidanza o un aumento del rischio di aborto spontaneo. Da qui l'importanza di congelare le uova quando la donna è ancora giovane per utilizzarle successivamente.

Inoltre, la vetrificazione degli ovociti permette di pianificare molto meglio i cicli di FIV, poiché offre la possibilità di accumulare ovociti nei risponditori bassi o di utilizzare ovociti crioconservati della donatrice senza dover sincronizzare la donatrice con la ricevente.

In un'intervista con il dottor Sergio Rogel, ginecologo della fertilità, ci ha detto questo:

Il fattore più importante che abbiamo oggi nelle cliniche di riproduzione assistita che produce fallimenti nel raggiungimento della gravidanza è l'età della donna.

Quindi è sempre più raccomandato, tenendo conto di come si evolve la nostra società e tenendo conto che le donne studiano sempre di più, hanno bisogno di più tempo per trovare un lavoro, hanno più difficoltà a trovare una vita stabile; si parla sempre più spesso del fatto che sarebbe molto interessante che queste donne riescano a congelare una parte delle loro uova in modo che in seguito possano essere abituate ad avere la loro prole senza che l'età sia un problema.

Processo di congelamento degli ovuli

La vetrificazione degli ovociti è una tecnica di congelamento ultraveloce che consiste nell'utilizzare sostanze crioprotettive per proteggere le ovuli dai danni causati dall'uso di alte velocità di raffreddamento.

Va notato che le ovule passano dalla temperatura ambiente a -196°C in meno di un secondo quando vengono introdotte nell'azoto liquido.

I crioprotettori sono molecole che sostituiscono il liquido acquoso all'interno degli ovociti e proteggono le loro strutture interne dalle basse temperature, poiché impediscono la formazione di cristalli di ghiaccio e la disidratazione cellulare.

In generale, il trattamento di vitrificazione degli ovociti è diviso in due fasi diverse: una che dipende dai ginecologi e un'altra che dipende dagli embriologi di laboratorio. Li commentiamo qui di seguito:

Ottenere gli ovociti

Il primo passo prima di iniziare un trattamento per vetrificare gli ovuli è di fare un'ecografia vaginale e un'analisi ormonale per controllare lo stato della riserva ovarica della donna.

La paziente deve poi passare attraverso un processo di stimolazione ovarica controllata, proprio come se dovesse sottoporsi ad un trattamento di FIVET. Per fare questo, il ginecologo dirà alla donna quali farmaci ormonali prendere.

La stimolazione ovarica consiste nel somministrare gli ormoni FSH e LH in modo che le ovaie sviluppino più follicoli contemporaneamente. Durante questo processo, la donna deve recarsi in clinica ogni 2 o 3 giorni per un controllo per vedere se la crescita follicolare è adeguata. A seconda della risposta ovarica, il ginecologo può regolare la dose di farmaci ormonali e i giorni di trattamento.

Infine, quando la maggior parte dei follicoli ha raggiunto una dimensione compresa tra 16 e 18 mm, il ginecologo programmerà la puntura follicolare per ottenere le uova.

La puntura follicolare è una semplice operazione in cui, utilizzando un ago guidato da un ultrasuono, il ginecologo perfora i follicoli per estrarre gli ovuli contenuti in ognuno di essi. Il processo dura circa 30 minuti e la donna viene sedata per evitare il disagio.

Dopo che gli ovuli sono stati estratti in sala operatoria, vengono portati al laboratorio di FIVET dove l'embriologo ne valuta lo stato di maturità e la qualità prima di procedere alla vitrificazione.

Per fare questo, le uova devono prima essere decumulate, cioè le cellule di granulosa che le circondano devono essere rimosse.

Tecnica di vitrificazione

Il metodo più comune per la vetrificazione degli ovociti è il marchio Kitazato Cryotop. Si tratta di un supporto costituito da un manico in plastica al quale è fissata una striscia trasparente alla quale, per tensione superficiale, l'uovo rimane attaccato dopo essere stato trattato con sostanze crioprotettive.

Di seguito elenchiamo i passi generali della tecnica:

  1. Gli ovociti vengono disidratati passando da un mezzo all'altro con una concentrazione crescente di crioprotettori.
  2. Con molta attenzione, 2-4 ovuli vengono posizionate sopra il sistema di supporto (il Cryotop) per essere congelate.
  3. Il mezzo in eccesso viene aspirato nel Cryotop con la pipetta in modo che il volume sia mantenuto al minimo.
  1. Il Cryotop con gli ovuli viene rapidamente introdotto in un serbatoio con azoto liquido.
  2. Il coperchio del Cryotop è posto con molta attenzione, senza tenerli lontani dai vapori dell'azoto liquido.
  3. Il Cryotop è conservato all'interno di un serbatoio di azoto liquido per la conservazione a lungo termine.

La tecnica di vitrificazione degli ovuli richiede una grande abilità e capacità da parte dell'embriologo, poiché si tratta di cellule molto piccole e delicate.

Sbrinamento e utilizzo degli ovuli

Una volta che gli ovuli vitrificati devono essere utilizzati, l'embriologo deve seguire un protocollo di devetrificazione che consiste in:

  1. Rimuovere il Cryotop dal serbatoio dell'azoto liquido, rimuovere il coperchio e immergerlo in un mezzo a 37 °C.
  2. Con l'aiuto di una pipetta, gli ovuli vengono staccate dal Cryotop lanciandovi sopra un mezzo di coltura. Questo processo deve durare un minuto.
  3. Gli ovuli vengono passate da un mezzo di devetrificazione all'altro con una concentrazione decrescente di crioprotettori per reidratarle. Gli ovuli devono essere in ogni terreno di devetrificazione per 3, 5 e 1 minuto rispettivamente.

È molto importante rispettare i tempi del protocollo di devitrificazione per farlo correttamente, altrimenti le strutture interne delle uova potrebbero essere danneggiate.

Gli ovuli devono essere scongelati circa 3 ore prima della fecondazione in laboratorio, che deve essere effettuata mediante iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI). Poiché sono stati precedentemente decumulati, gli ovuli devitalizzati non possono essere fecondati con il metodo convenzionale della FIVET.

Gli embrioni ottenuti saranno mantenuti in coltura per 3-5 giorni e poi l'embrione o gli embrioni di qualità superiore saranno trasferiti nell'utero della donna per cercare di ottenere una gravidanza. Gli embrioni che non vengono trasferiti possono essere ricongelati senza problemi per un uso futuro.

Vantaggi della vitrificazione degli ovuli

Come abbiamo detto all'inizio dell'articolo, la riserva ovarica di una donna diminuisce con l'età. Ciò significa che, con il passare degli anni, sia la quantità che la qualità degli ovuli diminuiscono.

Di conseguenza, le donne che rinviano la gravidanza sono spesso costrette a ricorrere a trattamenti di ovodonazione.

La vitrificazione degli ovuli offre molti vantaggi in questo senso, in quanto permette alle donne che decidono di diventare madri in età avanzata di avere figli biologici con i propri ovuli. Questo e altri vantaggi del congelamento delle uova sono discussi qui di seguito:

Preservazione della fertilità
non sono solo le donne che vogliono rimandare la maternità a dover congelare i loro ovuli. Questa tecnica è estremamente preziosa per le donne che si sottopongono a trattamenti oncologici o a interventi chirurgici che possono colpire le ovaie.
Conservazione della qualità degli ovuli
le basse temperature permettono di mantenere intatte tutte le proprietà delle uova, senza che il tempo abbia alcun effetto su di esse.
Maggiore probabilità di successo
una volta che la donna decide di usare i suoi ovuli, avranno l'età che aveva la donna quando ha deciso di congelarli, cioè saranno uova più giovani. Questo offre un tasso di gravidanza più alto, così come una minore possibilità di ottenere embrioni con anomalie cromosomiche che potrebbero portare ad un aborto spontaneo o alla nascita di un bambino malato.
Il trattamento è semplice
sebbene possano insorgere alcune complicazioni come l'iperstimolazione ovarica o altri sintomi fastidiosi dovuti al farmaco, in generale si tratta di una procedura semplice e rapida che può essere molto utile in futuro.
Permette l'accumulo di ovuli
questo consiste nell'eseguire diverse stimolazioni in fila fino ad ottenere un numero adeguato di ovociti da fecondare. L'accumulo di ovociti è molto utile per le donne con bassa riserva ovarica e/o low responder.
Eticamente corretto
ci sono alcune coppie che, a causa delle loro convinzioni, preferiscono congelare gli ovociti piuttosto che gli embrioni durante un trattamento di FIVET.

Per quanto riguarda la durata di conservazione delle uova congelate, l'embriologo Rocio Diaz ci dice quanto segue:

Considerando che sono a temperature criogeniche in azoto liquido, che sono a -196º, e che hanno tutte le loro funzioni biologiche sospese, il tempo che le uova congelate possono essere conservate è lungo, ma è ancora indeterminato dalla scienza.

Prezzi

Il costo della vetrificazione degli ovociti dipende dalla clinica in cui viene eseguito il trattamento e dalle prestazioni incluse nel budget iniziale.

Il suo prezzo è compreso tra 2.500 e 4.000 euro.

Inoltre, il farmaco per eseguire la stimolazione ovarica e ottenere le uova non è di solito incluso in questo prezzo, quindi bisogna aggiungere circa 500-1.000 euro in più.

Un altro aspetto da tenere in considerazione nella valutazione di un budget per la vetrificazione degli ovociti è l'inclusione della manutenzione degli ovociti. Alcune cliniche includono il primo anno o due di manutenzione, ma altre no. Normalmente, il costo di mantenimento delle uova congelate è di circa 300-400€ all'anno.

Quando una donna vuole usare questi ovuli per rimanere incinta, il trattamento di FIVET è più economico perché la prima fase per ottenere gli ovuli è già fatta. Pertanto, dovrete pagare solo circa 1.500-3.000€, che è il costo che corrisponde alla preparazione del campione di sperma, alla fecondazione tramite ICSI e al trasferimento degli embrioni.

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Domande più frequenti

È possibile vitrificare gli ovuli a 40 anni?

Da Victoria Moliner (embrióloga).

Tecnicamente è possibile, ma bisogna tener conto del fatto che a partire dai 35 anni di età, la riserva ovarica di una donna inizia generalmente a ridursi.

Pertanto, se la fertilità deve essere preservata, prima il processo viene fatto, meglio è.

Cosa c'è di meglio, per vitrificare ovuli o embrioni?

Da Victoria Moliner (embrióloga).

In realtà, non c'è trattamento migliore di un altro, poiché in entrambi i casi i tassi di sopravvivenza dopo il processo di devetrificazione sono superiori al 90% e la qualità sia degli ovuli che degli embrioni viene mantenuta.

La decisione di effettuare un trattamento o l'altro dipenderà dalla scelta personale della paziente, concordata con il suo medico, come se non avesse un partner al momento della vetrificazione potrebbe desiderare di vetrificare solo gli ovuli.

Quando è indicato il congelamento degli ovuli?

Da Zaira Salvador (embriologa).

L'indicazione principale della vetrificazione delle uova è quella di poter ritardare la maternità. Tuttavia, ci sono altre indicazioni molto importanti, come la conservazione della fertilità nei seguenti casi:

  • Le donne che si sottopongono a trattamenti aggressivi come la chemioterapia, in modo da poter diventare madri una volta superata la malattia.
  • Donne che hanno subito o subiranno un intervento chirurgico alle ovaie, come nel caso dell'endometriosi.
  • Donne che si stanno facendo rimuovere le ovaie a causa di un tumore.

Congelare gli ovuli fa male?

Da Zaira Salvador (embriologa).

Per congelare gli ovuli, la donna deve passare attraverso un processo di stimolazione ovarica e di puntura follicolare. Queste procedure possono essere scomode perché la donna deve assumere farmaci ormonali e poi sottoporsi ad un intervento chirurgico per rimuovere gli ovuli. Tuttavia, a meno che non ci siano complicazioni, non è doloroso.

Lettura consigliata

Se siete interessati a sapere in cosa consiste il processo di congelamento dello sperma per i maschi, vi invitiamo a farlo attraverso il seguente articolo: Come avviene il processo di congelamento dello sperma?

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Bibliografia

Alberto Reche y Manuel Martínez Moya. Preservación de la fertilidad. Manual de Buena Práctica Clínica en Reproducción Asistida (pp. 115-131). Sociedad Española de la Fertilidad

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Glujovsky D, Riestra B, Sueldo C, Fiszbajn G, Repping S, Nodar F, Papier S, Ciapponi A. Vitrification versus slow freezing for women undergoing oocyte cryopreservation. Cochrane Database of Systematic Review 2014, Issue 9. Art. No.: CD010047.

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Domande più frequenti: 'È possibile vitrificare gli ovuli a 40 anni?', 'Cosa c'è di meglio, per vitrificare ovuli o embrioni?', 'Quando è indicato il congelamento degli ovuli?' e 'Congelare gli ovuli fa male?'.

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Autori e collaboratori

 Rocío Díaz Giraldez
Rocío Díaz Giraldez
Embriologa
Laureato in Biologia ed embriologa specializzata in Medicina della Riproduzione con diversi anni di esperienza nei laboratori. Attualmente è direttore del laboratorio di embriologia del YES! Reproducción di Siviglia. Continua a leggere Rocío Díaz Giraldez
Dr. Sergio  Rogel Cayetano
Dr. Sergio Rogel Cayetano
Ginecologo
Laurea in Medicina e Chirurgia conseguita presso l'Università Miguel Hernández di Alicante con specializzazione in Ginecologia e Ostetricia presso l'Ospedale Generale di Alicante. Ha ampliato la sua esperienza nella riproduzione assistita mentre lavorava in diverse cliniche di Alicante e Murcia, fino a quando nel 2011 è entrato a far parte dell'equipe medica di FIV Spain.

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Numero associato: 03-0309100
 Victoria Moliner
Victoria Moliner
Embrióloga
Laureato in Biochimica e Scienze Biomediche presso l'Università di Valencia (UV), con un Master in Biotecnologie della Riproduzione Umana Assistita dall'UV e dall'Istituto Valenciano di Infertilità (IVI). Attualmente lavora come biologa di ricerca. Continua a leggere Victoria Moliner
 Zaira Salvador
Zaira Salvador
Embriologa
Laureato in Biotecnologia presso l'Università Politecnica di Valencia (UPV), laurea in Biotecnologia presso l'Università Nazionale d'Irlanda a Galway (NUIG) ed embriologo con un Master in Biotecnologia della Riproduzione Umana dell'Università di Valencia in collaborazione con l'Istituto Valenciano di Infertilità (IVI). Continua a leggere Zaira Salvador
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Adattato al italiano da:
 Romina Packan
Romina Packan
inviTRA Staff
Redattrice e traduttrice dell'edizione inglese e tedesca di inviTRA. Continua a leggere Romina Packan

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